用于骨软骨组织工程应用的新型羟基磷灰石/壳聚糖双层支架:植入山羊骨髓基质细胞的支架设计及其性能- ScienceDirect( Novel hydroxyapatite/chitosan bilayered scaffold for osteochondral tissue-engineering applications: Scaffold design and its performance when seeded with goat bone marrow stromal cells - ScienceDirect )

Joaquim M. Oliveira and Márcia T. Rodrigues and Simone S. Hydroxyapatite Chitosan Bilayered scaffold Osteochondral tissue engineering Stromal cells Autologous model

最近的研究表明，骨髓基质细胞是成骨细胞和软骨细胞的潜在来源，并且可以利用组织工程(TE)方法再生受损组织。然而，这些策略需要使用合适的支架结构，以支持骨和软骨组织或两者的从头形成，如在骨软骨缺损的情况下。后者由于被认为是一个难以实现的目标而引起了极大的关注。本研究采用烧结和冷冻干燥相结合的方法，研制了新型羟基磷灰石/壳聚糖（HA/CS）双层支架，旨在探讨其在骨软骨缺损修复中的应用前景。利用红外光谱、X射线衍射、显微计算机断层扫描和扫描电镜对所制备的HA/CS双层支架进行了表征。此外，还对HA/CS双层支架在压缩下的力学性能进行了评价。通过体外实验研究了HA/CS双层支架的吸水和失重特性。这是通过将支架浸泡在磷酸盐缓冲盐水中1至30天来完成的。用小鼠成纤维细胞样细胞进行细胞活性试验（MTS试验），研究了HA支架和HA/CS双层支架提取液的内在细胞毒性。结果表明，材料不发挥任何细胞毒性作用。此外，还进行了体外（I期）细胞培养研究，以评估HA层和CS层分别支持山羊骨髓基质细胞（GBMCs）生长和分化为成骨细胞和软骨细胞的能力。扫描电镜观察细胞粘附和形态学变化，MTS试验和DNA定量检测细胞活力和增殖情况。通过葡萄糖胺聚糖的合成来评价GBMCs的成软骨分化。结果表明,GBMCs在成骨培养液中培养14天后,碱性磷酸酶活性和免疫细胞化学检测结果显示,GBMCs在成骨培养液中培养21天后,可向软骨细胞分化,并有良好的粘附、增殖和成骨分化能力,而在成骨培养液中培养21天后,GBMCs在成骨培养液中的碱性磷酸酶活性和免疫细胞化学检测结果显示GBMCs在成骨培养液中有良好的成骨分化能力。研究了HA/CS双层支架的理化和生物学特性，结果表明，这些结构在骨软骨缺损的再生中具有很大的应用潜力，可以为骨软骨缺损的再生提供足够的组织替代物。

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