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小鼠短暂局灶性脑缺血后Akt磷酸化与神经元存活的证据( Evidence of Phosphorylation of Akt and Neuronal Survival After Transient Focal Cerebral Ischemia in Mice )
N Nosha A Wén A Suawara P Chan Akt Apoptosis Cerebral ischemia DNA fragmentation Phosphorylation PI3-kinase
丝氨酸-苏氨酸激酶Akt在几个细胞系统中通过丝氨酸-473的磷酸化来阻止细胞凋亡。磷酸化后，活化的Akt使其他凋亡因子失活，如Bad或caspase-9，从而抑制细胞死亡。本研究采用腔内阻断大脑中动脉造成小鼠局灶性脑缺血60min，观察了短暂局灶性脑缺血后丝氨酸-473位点Akt磷酸化和DNA断裂。应用免疫组化和Western blot分析Phospho-Akt。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的尿嘧啶核苷-5′-三磷酸-生物素缺口末端标记(TUNEL)检测DNA片段。免疫组化显示，再灌注4h时大脑中动脉区皮层phospho-Akt的表达明显高于对照组，而24h时phospho-Akt的表达明显低于对照组。Western blot分析显示，局灶性脑缺血4h后，皮质区磷酸化Akt显著升高，而缺血核心区磷酸化Akt显著降低。phospho-Akt和TUNEL双重染色显示phospho-Akt和TUNEL阳性细胞分布不同。磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002可阻止局灶性脑缺血后Akt的磷酸化，促进随后的DNA片段化。提示Akt磷酸化可能参与了短暂局灶性脑缺血后细胞的存活或死亡。
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