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丝氨酸/苏氨酸磷酸酶的亲和纯化质谱(AP-MS)( Affinity-purification mass spectrometry (AP-MS) of serine/threonine phosphatases )
GI Chen AC Gingras PP2A Affinity purification Mass spectrometry Protein interaction FLAG tag Tandem affinity purification (TAP) Background contaminants
丝氨酸/苏氨酸磷酸酶与调节蛋白的结合是决定其特异性的一个关键因素,这些结合蛋白的识别对于了解磷酸酶的功能和调节至关重要。亲和纯化/质谱(AP-MS)方法在鉴定这些相互作用体方面一直起着重要作用。在此,我们回顾了AP-MS的一般原理,并提出了两种与后续质谱兼容的亲和纯化方案,即FLAG纯化和串联亲和纯化(TAP)。我们已经成功地将这些协议用于PP2A、PP4和PP6的结合伴侣的鉴定,并且它们应该适合于其他磷酸酶的相互作用子的分析。
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