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滚动循环扩增(RCA)辅助CRISPR/Cas9切割(RACE)用于高特异性检测多种胞外囊泡MicroRNAs( Rolling Circular Amplification (RCA)-Assisted CRISPR/Cas9 Cleavage (RACE) for Highly Specific Detection of Multiple Extracellular Vesicle MicroRNAs )
Ruixuan Wang Xianxian Zhao Xiaohui Chen Xiaopei Qiu Guangchao Qing Hong Zhang Liangliang Zhang Xiaolin Hu Zhuoqi He Daidi Zhong Ying Wang Yang Luo
细胞外囊泡(EV)衍生的miRNAs（miRNAs）的多重检测在促进疾病诊断和预后评估方面具有重要作用。本文综合聚类规则间隔短回文重复序列/CRISPR相关核酸酶（CRISPR/CAS）系统和滚动循环扩增(RCA)技术的优点，建立了一个高特异性的恒温核酸检测平台，可同时定量多种EV衍生的miRNAs。特别是，所提出的方法证明了单碱基分辨率归因于挂锁探针介导的连接和原间隔区邻近基序(PAM)触发的裂解的双特异性识别。RCA辅助CRISPR/Cas9切割(RACE)和逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）在检测肺癌细胞和临床肺癌患者EV源miRNAs丰度方面的高度一致性验证了该方法的鲁棒性，揭示了其在多种疾病筛查、诊断和预后方面的潜力。总之，RACE是一个强大的工具，用于在护理点诊断和现场可部署分析中对核酸进行多重化、特异性检测。
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