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高强度耐有机溶剂蛋白酶的纯化及性质
姚忠 孙蓓蓓 李霜 何冰芳 碱性蛋白酶 耐有机溶剂 地衣芽孢杆菌 纯化 表征
分离纯化了白行筛选的耐有机溶剂的地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis YP1所产的溶剂稳定性蛋白酶.发酵液经硫酸铵沉淀,疏水层析及强阳离子交换层析纯化,得到电泳纯的蛋白酶;分子量约为28kDa,纯化蛋白酶的比酶活达 到1.18×10^5.U/mg,纯化倍数为37.2,酶活回收率为20.8%.纯化的YP1蛋白酶对500/0(φ)的多种亲水或疏水有机溶剂具有很高 的耐受性,其中50%(φ)的DMF和DMSO能显著促进YP1蛋白酶活力.YP1蛋白酶为Zn^2+蛋白酶,最适反应温度为55℃,最适反应pH为 10.0,pH8.0—13.0范围内具有高活力.以酪蛋白为底物,YP1蛋白酶的米氏常数%为0.048g/L.
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