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长春花Strictosidine β-D-Glucosidase基因短序列在大肠杆菌中的克隆及过表达( Cloning and Overexpression of Strictosidine β-D-Glucosidase GeneShort Sequence from Catharanthus Roseus in Escherichia coli )
AS Arafa AE Ragab Id AR Sayed ME Nasr
目的：长春花中二吲哚类生物碱的合成是一个关键酶，是长春花中二吲哚类生物碱合成的关键酶。本研究表明在大肠杆菌中不需要密码子优化就能产生该酶的短序列。方法：从玫瑰花叶片cDNA中扩增出缺少保守序列KGFFVWS和C端定位肽序列的strictosidine-p-d-glucosidase（sgd）基因短序列（1434 bp）,克隆并在大肠杆菌中表达。以玫瑰花叶总生物碱提取物为原料，对其在无细胞裂解液中产生的蛋白质进行了活性测试。结果：HPLC和LC-MS分析表明,盐酸克多西汀峰消失,而盐酸克多西汀峰消失,盐酸克多西汀峰消失,盐酸克多西汀峰消失。结论：SGD短序列在大肠杆菌中可以活性形式产生，无需密码子优化。
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