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人双特异性磷酸酶的表达克隆( Expression cloning of a human dual-specificity phosphatase )
T,Ishibashi D P,Bottaro A,Chan T,Miki S A,Aaronson
利用表达克隆策略，我们分离到一个编码人蛋白酪氨酸磷酸酶的cDNA。用噬菌体原核表达载体中的成纤维细胞cDNA文库感染表达角质形成细胞生长因子受体（BEK/成纤维细胞生长因子受体2）激酶结构域的细菌，并用单克隆抗磷酸酪氨酸抗体筛选。在几个抗磷酸酪氨酸识别能力下降的克隆中，有一个在体外显示了对激酶的磷酸酶活性。4.1kbase cDNA与痘苗病毒磷酸酶VH1序列相似性有限，编码185个氨基酸。纯化的重组蛋白在体外对几种活化的生长因子受体以及丝氨酸磷酸化的酪蛋白进行去磷酸化。对VH1和VH1相关蛋白(VHR)中保守的半胱氨酸残基进行诱变，丝氨酸和酪氨酸磷酸酶活性均完全丧失。这些特性表明VHR能够调节酪氨酸和丝氨酸磷酸化介导的细胞内事件。
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