基于溶解度的基因筛选确定环指蛋白126作为E3连接酶激活诱导胞苷脱氨酶

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作者：scidown 发布时间：2021-06-05 08:11:42 文章标题：

基于溶解度的基因筛选确定环指蛋白126作为E3连接酶激活诱导胞苷脱氨酶( Solubility-based genetic screen identifies RING finger protein 126 as an E3 ligase for activation-induced cytidine deaminase )

文章作者：

RK Delker Y Zhou Alexandras Strikoudis CE Stebbins FN Papavasiliou ubiquitin immunology lymphocyte

文章简述：

蛋白质-蛋白质相互作用通常通过与质谱联用的生化纯化或以酵母双杂交分析为例的遗传方法来鉴定；然而，这两种方法都不能很好地鉴定难溶蛋白的辅助因子。可溶性较差的蛋白质的溶解度被认为在辅因子结合时增加，可能是通过掩盖否则暴露的疏水结构域。我们利用这一概念开发了一种高通量的基因筛查，通过监测细菌在药物存在下的存活情况来识别与氯霉素乙酰转移酶融合的不溶性蛋白的相互作用伙伴。除了提供原理验证实验外，我们还将此筛选应用于激活诱导的胞苷脱氨酶(AID)，一种对抗体多样化至关重要的难溶蛋白。我们鉴定了一个独特的辅因子，环指蛋白126(RNF126)，通过传统的技术验证了它的相互作用，并表明它具有功能后果，因为RNF126能够泛在化AID。我们的结果支持了这种筛选技术的价值，并提示了一种涉及RNF126和泛素化的AID调节的独特形式。

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