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二硫仑通过抑制gasdermin D裂解和焦亡抑制单侧输尿管梗阻模型大鼠炎症和纤维化( Disulfiram inhibits inflammation and fibrosis in a rat unilateral ureteral obstruction model by inhibiting gasdermin D cleavage and pyroptosis )
Y Zhang R Zhang X Han
作为GSDMD的抑制剂,双硫仑(DSL)能显著抑制细胞焦下垂。细胞上皮下垂在肾纤维化中起着重要作用,用Lps和ATP诱导HK-2细胞形成上皮下垂模型,并用DSL治疗。CCK-8检测细胞活性。免疫荧光(IF)检测GSDMD。ELISA法检测炎性细胞因子的表达。流式细胞仪和Western印迹检测细胞凋亡和焦下垂。Ⅰ型胶原试剂盒检测胶原分泌,western印迹检测纤维化标志蛋白表达。然后建立单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型。HE染色检测肾组织损伤程度,Masson染色检测纤维化程度。TUNEL检测组织细胞凋亡水平。并用ELISA法检测外周血及肾组织炎症因子。应用免疫组化(IHC)法检测GSDMD的表达,Western blot法检测组织中凋亡和焦下垂相关蛋白的表达水平,发现DSL可通过抑制GSDMD的裂解而抑制GSDMD的细胞膜穿孔,从而抑制HK-2细胞炎症、焦下垂和纤维化的发生。但是如果细胞已经发生了焦下垂,DSL不能提供显著的预防。体内实验进一步验证了预处理DSL对肾纤维化损伤的抑制作用,双硫仑通过抑制GSDMD而抑制肾纤维化大鼠的炎症和纤维化。
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