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基于蛋白水解敏感性映射的ryanodine受体/连接通道复合物的表面形貌分析。( Surface topography analysis of the ryanodine receptor/junctional channel complex based on proteolysis sensitivity mapping. )
A R Marks S Fleischer P Tempst STEROIDS ANDROGEN BINDING HUMAN ADIPOSE TISSUE METHYLTRIENOLONE BINDING STEROID BINDING
兰尼碱受体/连接通道复合物(JCC)已被分离并在形态学上鉴定为跨越肌浆网和横小管之间间隙的足部结构。在功能上,JCC包含钙释放通道,介导骨骼肌兴奋-收缩偶联中的钙释放。通过电子显微照片的图像分析获得的JCC的三维结构揭示了两个不同的面和一个流出路径,由直径约为20 A的中心孔和四个通向肌浆的径向管指示。JCC由四个相同的原体组成,每个原体的Mr=565,233。在本研究中,对天然JCC进行蛋白水解消化,以深入了解其表面形貌。用内切蛋白酶Lys-C和Glu-C切割产生的肽通过反相高压液相色谱分离并测序。已经鉴定了24个切割位点,并等同于表面暴露肽。表面概率分析,结合蛋白酶敏感性,已被用于提供独立的信息来识别具有高可能性出现在表面上的序列。该分析还预测了具有低表面概率的序列,这些序列可能埋藏在结构的疏水核心中。此外,未被蛋白酶切割的高表面概率区域是表面-表面结合和/或亲水性内部钙外排途径的潜在候选区域。
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