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一种基于温启动数字crispr的核酸定量检测方法( A Warm-start Digital CRISPR-based Method for the Quantitative Detection of Nucleic Acids )
Xiaolin Wu Yie Hou Lee Timothy K Lu Hanry Yu
结合CRISPR/CAS系统的基于核酸的分子诊断工具正在被开发为病原体检测的快速和灵敏的方法。然而,大多数基于CRISPR/CAS的诊断缺乏定量检测能力。在此,我们报告了温启动快速数字Crispr方法(WS-RADICA),它使用商用数字芯片用于快速、灵敏和定量的核酸检测。WS-RADICA在40分钟(定性检测)或60分钟(定量检测)内检测到1拷贝/微升的新型冠状病毒RNA。WS-RADICA可以很容易地适应于各种数字设备:对两种数字设备进行DNA和RNA定量评估,线性动态范围为DNA 0.8-12777拷贝/微升,RNA 1.2-18391拷贝/微升(R2值均>0.99)。此外,WS-RADICA比本体RT-LAMP-Cas12b反应具有更高的敏感性和抑制剂耐受性,与RT-qPCR和RT-DPCR的反应性能相似。鉴于其速度、灵敏度、定量能力和抑制剂耐受性,WS-RADICA,显示出在各种需要核酸定量的应用中的巨大前景。
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