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二歧酚生物合成中3-氯-4-羟基苯甲酸构建块的体外表征( In vitro characterization of 3-chloro-4-hydroxybenzoic acid building block formation in ambigol biosynthesis )
IDM Kresna L Linares-Otoya T Milzarek ER Duell MM Mohseni U Mettal GM Knig TAM Gulder TF Schberle
蓝细菌Fischerella ambigua是一种天然的多氯芳香族化合物,即ambigols A-E。这些高卤代三苯基的生物合成基因簇(BGC)最近已通过异源表达鉴定出来。它由10个名为AB1-10的基因组成。其中两个编码酶,即Ab2和Ab3,经体外和体内测定鉴定为细胞色素P450酶,负责双芳基和双芳基醚的形成。这些P450酶的关键底物是2,4-二氯苯酚,它反过来又衍生自前体3-氯-4-羟基苯甲酸。本文通过体外实验研究了3-氯-4-羟基苯甲酸的生物合成步骤。Ab7是3-脱氧-7-磷酸庚酸(DAHP)合成酶的同工酶,通过莽草酸途径参与分支酸的生物合成。分支酸进一步被分支酸裂解酶(Ab5)转化,生成4-羟基苯甲酸(4-HBA)。独立的腺苷酸化结构域Ab6是激活4-HBA所必需的,其随后被栓系到酰基载体蛋白(ACP)AB8上。Ab8结合的底物在间位被Ab10氯化生成3-Cl-4-HbA,然后通过缩合(C)结构域转移到肽基载体蛋白上,并通过Ab9的硫酯酶(TE)结构域释放。然后预期释放的产物是卤化酶Ab1的专用底物,该卤化酶Ab1产生单体二歧化构建块2,4-二氯苯酚。
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