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亲水性相互作用液相色谱固定相LC-MS/MS测定豚鼠血浆中茶碱:方法开发、验证及研究应用( Quantification of Theophylline in Guinea Pig Plasma by LC-MS/MS Using Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography Stationary Phase: Method Development, Validation, and Application in Study )
M Kertys A Urbanova J Mokry theophylline HILIC liquid chromatography mass spectrometry guinea pig plasma
茶碱用于支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗已有70多年的历史。为了最大限度地提高茶碱治疗的有效性和安全性，药物的个体化剂量是非常重要的。在我们的研究中，我们着重于测定茶碱在豚鼠血浆中的浓度。建立了一种快速、特异、可靠的基于LC-MS/MS的方法，并根据欧洲药品管理局(EMA)指南进行了验证。对样品制备还原时间采用亲水作用液相色谱(HILIC)分离模式。分析样品以正电离方式定量。以氘代内标物[2H6]-茶碱为内标物,采用多反应监测(MRM)方法,分别用m/z 181.06 124.06和m/z 187.17 127.06进行定量分析。碰撞能的修正与色谱分离同时进行，以进一步消除基质的干扰。方法适用于0.5-30微克/毫升血浆样品。低、中、高浓度的质控样品日内、日间精密度和准确度的相对标准偏差(RSD)均小于10%。本方法成功地应用于豚鼠血浆中茶碱浓度的测定，为进一步了解茶碱在卵清蛋白致过敏性炎症模型中的作用提供了实验依据。
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