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用于噻虫嗪农药荧光适体的DNA适体的分离( The isolation of a DNA aptamer to develop a fluorescent aptasensor for the thiamethoxam pesticide )
Y Luo Z Jin J Wang P Ding R Pei
适体，因其对靶点的高亲和力和特异性而被称为化学抗体，作为检测农药的分析工具有很大的潜力。本工作采用改进的SELEX（Systemic evolution of ligands by exponential Enrhancing）策略,将ssDNA文库通过生物素标记的短互补链固定在链霉亲和素-琼脂糖珠上,获得了噻虫嗪的DNA适体。经过13轮筛选，成功丰富了随机ssDNA池。通过测序和分析，筛选出3个核酸适体候选序列，并转化为荧光探针，评价其与噻虫嗪的相互作用。以最佳适体(FAM-Thi13)为基础,采用短猝灭链设计了噻虫嗪荧光启动适体,该适体对噻虫嗪的线性范围为10~1000 nM,检出限为1.23 nM。利用分子对接和分子动力学方法研究了适体素的主探针(FAM-Thi13)与噻虫嗪的结合位点。用所研制的荧光适体检测器对环境水样中噻虫嗪进行定量检测，也取得了满意的结果。
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