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基于支架的核糖核蛋白递送( Scaffold-Based Delivery of Ribonucleoproteins for )
WH Chooi JS Chin SY Chew
简单通用的CRISPR/Cas9系统是哺乳动物细胞基因组编辑的一种很有前途的策略。通常，基因组编辑组分，即Cas9蛋白和单导RNA（sgRNA）以质粒、mRNA或核糖核蛋白(RNP)复合物的形式递送。特别是，非病毒方法是可取的，因为它们克服了病毒载体带来的安全问题。为了控制组织再生的细胞命运，基于支架的基因组编辑组分的递送将为局部递送提供一条途径，并与由同一支架共同递送的其他因素（如地形线索）提供可能的协同效应。在本章中，我们详细介绍了一种简单的表面修饰方法，利用CRISPR/Cas9 RNP复合物对电纺纳米纤维进行功能化处理。以贻贝为灵感的生物粘附涂层是一种将生物分子固定在表面的简单而有效的方法。纳米纤维将提供一个仿生的微环境和地形线索的种子细胞。为了评估，将使用具有单拷贝增强型绿色荧光蛋白(U2Os.EGFP)的模型细胞系来验证基因破坏的效率。
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