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在与CaV1.2通道相互作用时,中心连接的钙调素突变体降低了与PreIQ和IQ的结合亲和力( Calmodulin mutant in central linker reduces the binding affinity with PreIQ and IQ while interacting with CaV1.2 channels - ScienceDirect )
Y Liu S Yan S Chen J Zhang Y Shen J Su G He R Feng D Shao L Hao
钙调素(CaM)与CaV1.2通道的PreIQ和IQ相互作用,但至今尚未发现CaM的明确结合位点。因此,在本研究中,我们首次利用MOE(Molecular Operating Environment)进行蛋白质-蛋白质对接,发现在界面中起重要作用的CaM最可能的残基集中在中心连接区。接下来,我们通过GST下拉法检测了CaM及其突变体与PreIQ和IQ的结合特性。在这里我们证实了CaM以浓度依赖和[Ca]依赖的方式与PreIQ和IQ结合。然而,通过突变N-叶和C-叶的两个Ca结合位点来沉默N-叶和C-叶的作用,可消除CaM结合的[Ca]依赖性,但不影响结合。中心连接子突变体降低了CaM/PreIQ和CaM/IQ的结合,特别是在低[Ca]时降低了CaM/PreIQ和CaM/IQ的结合。我们证实了N-叶和C-叶在感知Ca的变化中起着重要作用,并发现CaM的中心接头参与CaM与CAV1.2通道的结合,特别是在低[Ca]时,不仅参与与PreIQ的结合,还参与与IQ的结合。
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