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泛素连接酶Siah2调节混响α降解和哺乳动物生物钟( Ubiquitin ligase Siah2 regulates RevErbα degradation and the mammalian circadian clock )
Jason P,DeBruyne Julie E,Baggs Trey K,Sato John B,Hogenesch RevErbα/Nr1d1 Siah2 circadian clock ubiquitin ligase screen
蛋白酶体对蛋白质的调节降解对其在动态细胞通路中的功能通常是至关重要的。哺乳动物生理节律的分子钟依赖于其核心成分的节律表达和降解。然而,由于可用于识别特定蛋白质降解机制的工具有限,调控时钟蛋白降解的机制才刚刚开始阐明。在这里,我们描述了一种基于细胞的功能筛选方法,旨在快速识别泛素E3连接酶,诱导降解潜在的任何感兴趣的蛋白质。我们从哺乳动物生物钟的关键组成部分--核激素受体Reverbα(Nr1d1)中筛选了调节其稳定性的E3连接酶,发现7个缺如Siah2)是Reverbα稳定性的关键调节因子。Siah2的过度表达破坏了混响α/β的稳定性,Siah2的siRNA耗竭稳定了内源性混响α。此外,Siah2耗尽延缓了混响α的昼夜降解,延长了周期长度。这些结果证明了功能性筛选方法在识别蛋白质稳定性调节因子方面的有效性,并揭示了Siah2是一个先前未被识别的昼夜时钟调节因子,它介导了昼夜混响α的翻转。
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