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用于膜蛋白动力学分析的单分子荧光技术( EXPRESS: Single-Molecule Fluorescence Techniques for Membrane Protein Dynamics Analysis )
Z Yang H Xu J Wang W Chen M Zhao
基于荧光的单分子技术，主要包括荧光相关光谱(FCS)和单分子荧光共振能量转移(smFRET)技术，能够分析生物大分子的构象动力学和多样性。由于它们具有较强的时空不均一性和对痕量分析物的需求，因此被应用于膜蛋白（如膜受体和膜转运蛋白）的动力学分析。在这篇综述中，我们首先介绍了FCS和SMFRET所涉及的基本原理。然后我们总结了膜蛋白分子的标记和固定化策略，基于共聚焦和基于TIRF的仪器配置，以及数据处理方法。详细介绍了该方法在膜蛋白动力学分析中的应用,重点讨论了荧光团的选择、标记位点、实验装置和分析方法。在最后一部分中，还简要讨论了尚待解决的挑战和这一领域的进一步发展。
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