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可诱导RhoA GTPase信号的单组分光遗传工具( Single-component optogenetic tools for inducible RhoA GTPase signaling )
EE Berlew IA Kuznetsov KK Yamada LJ Bugaj BY Chow light-oxygen-voltage optogenetics RhoA
我们创造了光遗传学工具来控制RhoA GTP酶,一个调节肌动蛋白组织和肌动球蛋白收缩的中枢。RhoA GTPase或其上游激活的GEF效应子与BcLOV4融合,该受体可通过光调节的蛋白质-脂质静电作用与内小叶动态地被吸收到质膜上。这些效应物的直接膜募集诱导了强大的收缩信号,足以分离贴壁连接,以响应仅一个蓝光脉冲。细胞骨架形态的变化依赖于空间模式刺激与潜在的细胞极化的对准。RhoA介导的细胞骨架激活在几分钟内诱导了YAP核定位和随后的机械转导,YAP-TEAD转录活性证实了这一点。这些不需要蛋白质结合伙伴的单组分工具提供了对RhoA信号的时空精确控制,将推进其在细胞迁移、形态发生和细胞周期维持中的多种调节作用的研究。
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