P–307 Fatty acid degradation during in vitro decidualization of human endometrial stromal cells

Mestre Citrinovitz A C Jauckus J Hauke J Langhans C D Schwarz K Zorn M Strowitzki T Okun J G Germeyer A

学习问题。在人子宫内膜基质细胞(HESC)体外蜕膜化过程中，参与脂肪酸降解的β-氧化途径的活性是否被改变？总结回答。脂肪酸转运蛋白的表达水平提示HESC在蜕膜过程中线粒体β-氧化途径的活性增强。已经知道的。子宫内膜基质细胞(ESC)的分化称为蜕膜化，是母儿间期正常形成的关键。蜕膜化的一个重要特征是葡萄糖消耗增加。在子宫内膜中，葡萄糖通过葡萄糖转运蛋白(GLUT)结合到ESC中。脂肪酸是活细胞中另一种重要的能量来源。脂肪酸通过肉碱-棕榈酰转移酶1和2(CPT1和2)进入线粒体，并通过β-氧化途径在线粒体中降解。已有研究表明，CPT1的抑制作用影响ESC蜕膜化。然而，在蜕膜化过程中，脂肪酸降解的转换是否被改变尚不清楚。研究设计，规模，持续时间。本研究采用原发性HESC进行。子宫内膜活检取健康定期骑自行车的妇女(33.6±2.2岁），在获得书面知情同意后（伦理委员会批准的方案编号S-239/2005)。用蜕膜化鸡尾酒（含醋酸甲羟孕酮、雌二醇和8-溴环磷酸腺苷）体外蜕膜化(D)6天。非蜕膜化(ND)对照组用车辆溶液处理。收集细胞培养上清和细胞提取物，用于评价蛋白/基因表达和代谢产物含量。参与者/材料，设置，方法。通过测定细胞培养上清中催乳素(PRL)蛋白水平（mu/L）来评价蜕膜化。实时聚合酶链反应（RT-PCR）检测GLUT1、CPT1A、CPT2基因mRNA表达水平的变化。采用ΔΔCT法（内部对照:RPLP0)（D组与ND组比较，折叠变化-FC-)进行分析。采用电喷雾-串联质谱（ESI-MS/MS）法（nmol/mg总蛋白）测定酰基肉碱的含量。N=5,平均±SEM。采用配对学生t检验进行统计学分析。主要结果和偶然性的作用。蜕膜化鸡尾酒处理的HESC细胞培养上清中PRL蛋白水平显著高于ND细胞(ND16.80±0.73mu/L；D684.20±219.80mu/L,P<0.05)。这一结果证实了蜕膜化鸡尾酒体外处理HESC的蜕膜化状态。与ND细胞相比，GLUT1的mRNA表达水平显著升高(Fc10.02±2.90,***P<0.001)，与蜕膜化过程中葡萄糖消耗增加的特征一致。一旦证实HESC蜕膜化状态，评估CPTA1和CPT2的mRNA表达水平。两种脂肪酸转运体的mRNA表达水平在D细胞中均较ND细胞升高(CPTA1:FC 1.84±0.44,**P<0.01；CPT2:FC 2.04±0.49,**P<0.01)。最后，评价了脂肪酸β-氧化降解的中间代谢产物酰基肉碱的含量水平。乙酰-(C2)和丁酰-(C4)酰基肉毒碱含量在D组较ND组明显降低[(C2:ND总蛋白1.37±0.10nmol/mg；D1.06±0.20nmol/mg,*P<0.05)；(C4:ND总蛋白0.03±0.01nmol/mg；D0.01±0.00nmol/mg,*P<0.05)]。D细胞与ND细胞提取物中其他中间酰肉碱含量无差异(p>0.05)。限制，谨慎的理由。本研究是在体外使用蜕膜化鸡尾酒处理的原发性HESC进行的。活细胞内不同代谢途径的相互联系是非常复杂的。需要进一步的研究来确定不同的int

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