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内生纤维素酶基因MaCel1的克隆与表达分析( Molecular Cloning and Expression Analysis of the Endogenous Cellulase Gene MaCel1 in Monochamus alternatus )
Y Li H Chen X Chu Q Ma X Hu
本研究的目的是对松材线虫松材线虫(PWD)的重要载体松褐天牛的内源纤维素酶基因MaCel1进行鉴定。本研究采用快速扩增cDNA末端(RACE)方法克隆MaCel1，并用RT-qPCR（实时定量PCR检测）分析MaCel1的表达。共获得1778 bp的cDNA。该基因的编码区长度为1509 bp,编码一个含有502个氨基酸的蛋白质，分子量为58.66kDa,等电点为5.46。序列相似性分析表明，MaCel1的氨基酸序列与光肩星天牛β-硫代葡萄糖苷有较高的相似性，与其他昆虫纤维素酶基因(GH1)的相似性略低。MaCel1的β-D-葡萄糖苷酶活力为256.02±43.14U/L,无β-硫代葡萄糖苷活力。MaCel1基因在松褐飞虱肠道中广泛表达。MaCel1基因在雄性（3.46）和雌性（3.51）成虫中的表达水平显著高于其他发育阶段，蛹期最低（0.15）。研究结果将有助于揭示松褐飞虱的消化机制，为通过控制松褐飞虱控制PWD奠定基础。
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