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基于itraq的A549人肺上皮细胞与烟曲霉分生孢子相互作用的蛋白质组学分析( iTRAQbased proteomic analysis of the interaction of A549 human lung epithelial cells with Aspergillus fumigatus conidia )
X Zhang D He S Gao Y Wei L Wang
当人体免疫功能受损时，就会发生严重的侵袭性曲霉病感染。烟曲霉（A.fumigatus）分生孢子与II型肺上皮细胞的相互作用在疾病进展中起着重要作用。本研究比较了A549人肺上皮细胞感染烟熏菌和不感染烟熏菌的蛋白质组。进行基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)和蛋白质相互作用分析，并用western blotting和逆转录定量PCR（RTqPCR）验证差异蛋白表达。此外，还进行了RNA干扰法、内化试验和ELISA。用等压标记进行相对和绝对定量分析，共检测到1582个蛋白，其中差异表达蛋白111个（折叠变化>1.5或<0.75)。其中18个蛋白上调，93个蛋白下调。GO和KEGG分析表明，改变的蛋白质主要参与细胞代谢、合成、细胞应激反应、代谢途径和丙酮酸代谢等生物学功能。Nmyc下行调节基因1(NDRG1)表达上调1.88倍，CD44表达下调0.47倍。通过western blotting和RTQPCR验证特异性蛋白的表达水平。内化效率受NDRG1基因沉默的影响。抑制CD44可影响IL6和IL8的分泌。提示烟熏菌影响肺上皮细胞的代谢和生物合成功能。包括NDRG1和CD44在内的许多新分子被发现与烟熏虫感染有关。
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