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在大肠杆菌中构建高效生产生物素的异源合成途径( Engineering a heterologous synthetic pathway in Escherichia coli for efficient production of biotin )
PP Wei FC Zhu CW Chen GS Li
目的通过构建异源生物素合成途径,提高大肠杆菌的生物素产量。结果将恶臭假单胞菌生物素操纵子基因导入大肠杆菌生产生物素。从枯草芽孢杆菌中引入编码pimeloyl-CoA合成酶的bioW基因和从酿酒酵母中引入编码S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)合成酶的sam2基因,有助于在重组大肠杆菌中异源生产生物素。此外,通过优化发酵组分,尤其是与山梨酰辅酶A和SAM合成有关的前体-山梨酸和L-蛋氨酸,有效地提高了生物素的产量。外源生物素操纵子基因的过度表达和关键中间体pimeloyl-CoA和SAM的供应增加了大肠杆菌生物素产量的121倍以上。通过生物过程工程的努力,生物素在摇瓶中的最终滴度为92.6mg/L,在补料分批发酵罐中的最终滴度为208.7mg/L。结论通过引入异源生物素合成途径,增加前体pimeloyl-CoA和辅助因子SAM的供应,可显著提高大肠杆菌生物素产量。
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