合成设计的抗菌肽(AMPs)具有取代抗生素治疗细菌感染的潜力。然而,微生物对AMPs的耐药性已有报道,但对这种耐药性的潜在机制知之甚少。天然存在的抗菌肽B(cecropin B,CB)破坏革兰氏阴性菌的阴离子细胞膜。本研究通过将副猪嗜血杆菌SH0165暴露于一系列CB浓度下,诱导其产生CB抗性(CBR)。获得了耐Cb的副猪嗜血杆菌菌株CBR30和CBR30-50。SH0165和CBR30的生长曲线显示CBR30的生长速度低于SH0165。透射电镜观察结果表明,耐CB菌株CBR30和CBR30-50的细胞膜较SH0165光滑。基因芯片检测到257个上调基因和254个下调基因,覆盖了耐CB菌株CBR30的20个同源群(COGs),与SH0165比较(>1.5倍变化,P0.05,(2)=0.003)。不同年龄组的发病率为19.72%(95%CI10.46~28.97)~75.00%(95%CI32.57~100),种猪高于仔猪,差异有统计学意义(P<0.05)。公猪副猪H.感染率(45.03%,95%CI 37.57-52.49)显著高于母猪(30%,95%CI 22.41-37.59)(P<0.05,(2)=7.361)。藏猪性别是副猪H.感染的主要危险因素。本调查结果表明,副猪H.parasuis在西藏藏猪中分布广泛,进一步的调查应更好地评估副猪H.parasuis在藏猪中的传播情况。据我们所知,本研究是我国首次报道藏猪副猪嗜血杆菌感染。副猪嗜血杆菌是一种重要的经济病原体,有15个已知的血清型。建立了一种酶联免疫吸附试验(ELISA),检测13个副猪链球菌血清中存在的寡肽渗透酶A(OppA)多肽膜蛋白的血清抗体。用OppA-ELISA法对2个猪场的副猪H.parasuis血清学特征进行了评估,血清转换定义为OppA-ELISA样本阳性(S/P)比值为0.5。每个农场的10头小母猪用无毒活菌苗(农场1)或灭活自体菌苗(农场2)接种副猪链球菌疫苗。血清转换率分别为100%和90%,平均S/P比(MSR)分别为3.36和1.43。在每个猪场用免疫母猪所产下的10头一胎(P1)、10头二胎(P2)和10头三胎(P3)中,随机抽取2头公、母仔猪,进行OppA-ELISA MSPRs检测,结果表明,每头仔猪的MSPRs均为OppA-ELISA MSPRs的阳性率为0.0%,阳性率为0.0%,阳性率为0.0%,阳性率为0.0%,阳性率为0.0%,阳性率为0.0%。在两个农场中,产后MSPRs和血清阳性率在P1坝高于P2坝和P3坝。第1胎仔猪的MSPRs和血清阳性率高于第2胎仔猪,差异显著(P<0.05)。对鼻拭子的聚合酶链反应分析表明,在断奶时,100%的农场1仔猪和47-84%的农场2仔猪(视胎次而定)为副猪链球菌定植。结果表明,用副猪嗜血杆菌HS80全菌悬液免疫BALB/c小鼠SP2/0骨髓瘤细胞和脾细胞,获得抗副猪嗜血杆菌单克隆抗体1B3。Dot-blot和Western blot分析表明,该单抗1B3与15株副猪链球菌血清型参考株均有较强的反应性。免疫沉淀和蛋白质谱分析表明,寡肽渗透酶A(OppA)识别的单抗1B3属于ATP结合盒转运蛋白家族。此外,线性B细胞表位