纳米雄黄抗B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的体外作用研究

姜爽 王晓波 张治然 孙岚 李劲草 张英鸽 雄黄 纳米雄黄 水飞雄黄 B细胞淋巴瘤 非霍奇金淋巴瘤 细胞凋亡

目的考察纳米雄黄对B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的体外作用.方法利用激光粒度仪,TEM和AFM对纳米雄黄和水飞雄黄进行表征;利用光镜,AFM和TEM依次观察纳米雄黄和水飞雄黄作用下Raji细胞的增殖形态变化,单细胞表面细胞膜变化以及细胞内超微结构的变化;MTT法检测纳米雄黄和水飞雄黄作用下的细胞存活率;利用荧光显微镜及流式细胞术观察纳米雄黄和水飞雄黄引起Raji细胞的凋亡和细胞周期分布情况.结果纳米雄黄的粒径为(79±8)nm,水飞雄黄的粒径为(189±02)μm.光镜下,可明显观察到纳米雄黄可抑制Raji细胞的聚集生长状态,AFM下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞皱缩,体积变小,膜表面的黏附物质不再向四周伸展,而水飞雄黄作用下的Raji细胞变化不明显.TEM下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞胞内亚细胞器受到破坏,线粒体空泡明显增多,水飞雄黄组变化不明显.MTT结果显示,50mg·L-1纳米雄黄作用Raji细胞24h时,细胞的存活率为(40±2)%,而相同剂量的水飞雄黄作用组为(65±3)%;50mg·L-1纳米雄黄作用Raji细胞48h时,Raji细胞的存活率仅为10%,而相同剂量的水飞雄黄组,Raji细胞的存活率为(42±2)%.荧光显微镜下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞核凋亡明显,水飞雄黄组作用不明显.流式细胞术结果显示,水飞雄黄作用下的Raji细胞总凋亡率为1114%,而纳米雄黄处理组的Raji细胞总凋亡率为159%.与水飞雄黄相比,纳米雄黄作用下Raji细胞在G1期的分布比例明显升高,S期分布比率下降.结论与水飞雄黄相比,相同剂量的纳米雄黄在相同作用时间下,可明显抑制B细胞淋巴瘤Raji细胞的增殖,破坏其亚细胞结构,进而引起其凋亡.

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