分枝杆菌Mce4转运体是多蛋白复合体的证据( Evidence for the Mycobacterial Mce4 Transporter Being a Multiprotein Complex )

L Rank LE Herring M Braunstein

分枝杆菌具有输入脂质的Mce转运体，被认为与ATP结合盒(ABC)转运体具有类似的功能。然而，ABC转运体通过单一溶质结合蛋白(SBP)输入底物，将底物传递给膜中的渗透酶蛋白，而分枝杆菌Mce转运体具有6个SBP(MceA-F)，与一对permease(YrbEA-B)、胞质ATP酶（MceG）以及多个Mce相关膜(Mam)和孤儿-Mam（Omam）蛋白一起工作，以转运脂质。在本研究中，我们使用模式分枝杆菌，耻垢分枝杆菌，研究单个Mce，Mam和Omam蛋白在Mce4转运胆固醇过程中的需求。我们研究的所有Mce4和Mam4蛋白都是胆固醇摄取所需的。然而，并不是所有由mce位点以外的基因编码的Omam蛋白都被证明有助于胆固醇输入。胆固醇输入需要OmamA和OmamB,而OmamC、D、E和F不需要。在没有任何单一的Mce4、Mam4或Omam的情况下，Mce4A和Mce4E的丰度下降。Mce4A和4E水平与这些附加蛋白之间的这种关系提示了一个组装和/或稳定多蛋白Mce4转运体复合物的相互作用网络。通过免疫沉淀-质谱法进一步支持Mce转运蛋白是多蛋白复合物，我们在此鉴定了每一个在胆固醇转运中起作用的Mce、YrbE、MceG、Mam和Omam蛋白都与MCE4A相关。这项研究是首次发现这些Mce4转运蛋白有关联。重要性：脂类如何在diderm细菌的膜之间移动是一个具有挑战性的机制问题，因为脂类是疏水分子，必须穿过亲水的周质。对于分枝杆菌来说，这个问题就更加复杂了，因为分枝杆菌有一个独特的细胞包膜，对分子来说是高度不可渗透的。越来越多的知识发现Mce转运体是分枝杆菌的脂质输入体。在此，通过蛋白质稳定性实验和免疫沉淀-质谱分析，我们为分枝杆菌Mce转运体以多蛋白复合物的形式存在提供了证据。

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