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肠上皮细胞中27-炔胆固醇的npc1l1依赖性转运( NPC1L1-Dependent Transport of 27-Alkyne Cholesterol in Intestinal Epithelial Cells )
AL Ticho N Calzadilla P Malhotra H Lee WA Alrefai
尼曼-匹克C1样-1（NPC1L1）介导肠上皮细胞对胶束胆固醇的摄取，是降胆固醇药物依泽替米贝（EZE）的分子靶点。由于缺乏可以通过荧光成像和生化方法追踪的合适的NPC1L1底物，导致胶束胆固醇细胞内穿梭的详细机制还不完全清楚。27-炔烃胆固醇先前已被显示为类似于天然胆固醇的不同细胞过程的底物。然而，尚不清楚炔烃胆固醇是否通过NPC1L1依赖性途径吸收。我们旨在确定炔烃胆固醇是否是肠细胞中NPC1L1的底物。在存在或不存在EZE的情况下，人肠上皮Caco2细胞与含有炔烃胆固醇的胶束一起孵育。在C57BL/6J小鼠的小肠闭环中注射含有炔烃胆固醇的胶束，加入或不加入EZE。Caco2细胞中炔烃胆固醇的酯化被EZE和网格蛋白介导的内吞作用抑制剂Pitstop 2显著抑制。酰辅酶a胆固醇酰基转移酶（ACAT）的抑制剂同样减少了酯化作用。炔烃胆固醇有效地标记了Caco2细胞的顶膜，并且通过对外源性胆固醇氧化酶的可及性判断，EZE显著增加了保留在膜上的量。在小鼠小肠中，EZE的存在减少了约75%的总炔烃胆固醇摄取。这些数据表明炔烃胆固醇作为NPC1L1的底物，并且可以作为非放射性示踪剂来测量体外和体内模型中的胆固醇吸收。
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