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使用发光的RNA适配体对microRNA的高度敏感的多重检测( Highly sensitive multiplex detection of microRNA using light-up RNA aptamers )
T Yoon S Kim J Shin Y Zhou KS Park
参与多种生物学过程的MicroRNAs(miRNA)可作为多种癌症早期诊断和预后的重要生物标志物。定量逆转录PCR是临床检测miRNAs的金标准方法,但其需要昂贵的设备和复杂的引物设计,从而阻碍了其在现场的应用。在此,我们开发了一种简单、经济的策略,用于miRNA的多重检测,使用发光RNA适体作为关键检测组分。原则上,靶miRNAs的存在通过链置换扩增结合转录扩增产生大量发光RNA适体如菠菜和芒果适体。因此,发光RNA适体与相应的荧光原结合,在不同波长上发出高度增强的荧光信号,从而实现对靶miRNAs的多重检测。用该方法同时测定了目标miRNAs如miR21和miR141,检测限分别为0.955fM和0.195fM。该方法成功地应用于不同细胞系中miRNAs的定量检测,显示了其在临床诊断和预后判断中的实用价值。
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