产生一氧化氮的前药Js-K逆转AML细胞的多药耐药表型( The Nitric Oxide-Generating Prodrug Js-K Reverses the Multi-Drug Resistance Phenotype in AML Cells )

S Morys C Gannage M Terrazas I Kaur PJ Shami

一氧化氮(NO)对急性髓系白血病(AML)细胞有毒性作用。非前药O2-(2，4-二硝基苯基）1-[(4-乙氧基羰基）哌嗪-1-基]二氮-1-碘-1,2-二醇酯（JS-K）是芳基化二氮二醇酯类的先导剂。JS-K在体内外对AML、多发性骨髓瘤和几种实体瘤都有活性。JS-K对恶性细胞具有直接的细胞毒作用，在体内外抑制血管生成。针对其治疗AML的临床应用，我们采用PluronicP123聚合物，研制了一种纳米级的JS-K(P123/JS-K)胶束制剂。AML治疗失败的一个主要原因是多药耐药(MDR)表型与白血病细胞过度表达P-糖蛋白(Pgp)有关。本研究以HL-60细胞和HL-60/RV+细胞为模型，研究JS-K及其制剂对AML细胞耐多药耐药表型的影响。HL-60/RV+是从亲本HL-60中筛选出来的表达PGP的亲本。它们在长春新碱(VCR)选择下培养。我们研究了单独制剂(P123)、不含制剂的JS-K（游离JS-K）和制剂中的JS-K(P123/JS-K)的作用。VCR和游离JS-K对HL-60细胞均有细胞毒作用，其50%抑制浓度(IC50)分别为0.4和0.1μm左右。VCR处理的HL-60/RV+细胞的IC50大于1μM。游离JS-K对HL-60/RV+有细胞毒作用，IC50约为0.2μm。用游离JS-K(0.1μm)、P123/JS-K(0.1μm)或等体积P123致敏的HL-60/RV+细胞预处理2小时，对VCR的影响：培养3天后，VCR IC50分别从对照细胞的1.5μm上升到P123、游离JS-K和P123/JS-K预处理细胞的1、0.9和0.75μm。然后，我们用异丙啶染色法对JS-K和VCR不同组合处理的HL-60/RV+细胞进行了细胞周期分析。用VCR(1.75μm)、游离JS-K(0.1μm)、P123/JS-K(0.1μm)或等效体积的P123组合处理细胞。24小时后，未处理组、游离JS-K、P123/JS-K、VCR、游离JS-K+VCR、P123+VCR、P123/JS-K+VCR的亚G0/G1片段的平均百分率分别为7、6、14、14、25、26和43。48h时，相同变量的亚G0/G1分数分别为4、5、5、19、20、23和28%。72h时，相同变量的亚G0/G1分数分别为3、3、3、11、12、19和19%。因此，在24小时观察到对细胞周期的峰值效应。我们还观察了单独使用P123的效果。为了确定JS-K是否影响外排泵本身，我们研究了0.1μm游离JS-K、0.1μm P123/JS-K或等效体积P123对HL-60/RV+细胞Rho-123积累的影响。游离JS-K、P123和P123/JS-K组的Rho-123累积量（平均9个重复）分别为143、159和144个（与对照组比较均P<0.05)。应用流式细胞术，我们还测定了JS-K是否影响了用0.1μm游离JS-K、0.1μm P123/JS-K或等效体积P123处理的HL-60/RV+细胞Pgp的表达。24小时后，P123、JS-K和P123/JS-K的Pgp平均表达率分别为90、79、63(P123/JS-K与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。48h后，相同变量组Pgp平均6个重复序列的表达率分别为83、79、57(P<0.05)，P123/JS-K与对照组比较差异有显著性意义）。72h后，不同处理组与未处理组间Pgp表达无显著性差异。我们认为P123 Pluronic制剂中的JS-K可以逆转多药耐药表型。Pluronic聚合物本身也可能影响多药耐药表型。因此，P123/JS

SciDown文献求助系统（解决99%问题） Public Download ResearchGate bloodjournal.org