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高效液相色谱-荧光法或超高效液相色谱-四极杆/轨道阱质谱法测定抑郁症小鼠海马中5-羟色胺和相关的2种物质含量的比较
王丽 朱军 环飞 程洁 吴倩 高效液相色谱附荧光检测法 5-羟色胺 色氨酸 5-羟吲哚乙酸 抑郁症 小鼠海马
为测定抑郁症小鼠海马中5-羟色胺(5-HT),色氨酸(TRP)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),比较了两种测定方法的应用,即带荧光检测器的高效液相色谱法(HPLC-FLD)和超高效液相色谱-四极杆/轨道阱质谱法(UHPLC-Q-Obitrap-MS)的比较.样品的前处理选用0.4 mol·L-1高氯酸溶液以1:5(g:mL)比例加入于小鼠海马组织的匀浆液中沉淀其中的蛋白,经涡旋和离心后取上清液,分别按上述两种方法进行测定.在两种方法中均采用C18柱分离.试验结果表明:Q-Obitrap-MS测定显示较强的基质干扰,而HPLC-FLD测得的5-HT,TRP和5-HIAA的色谱峰形对称,峰宽窄,基质无明显干扰.3种目标物的质量浓度在500.0 μg·L-1以内呈线性.不同浓度水平的加标回收率为86.2%,92.1%,91.0%.上述3项测定目标物的检出限(3S/N)依次为1.0,1.0,0.5 μg·L-1.
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