在成釉细胞样细胞系ALC中，ODAM通过激活WNT1信号通路促进连接上皮相关基因的表达( ODAM promotes junctional epithelium‐related gene expression via activation of WNT1 signaling pathway in an ameloblast‐like cell line ALC )

D Song S Yang T Tan R Wang Z Ma Y Wang L Wang ameloblast junctional epithelium ODAM WNT1

目的探讨牙源性成釉细胞分离蛋白(ODAM)在成釉细胞样细胞ALC中促进连接上皮相关基因表达的作用及其机制。背景ODAM在成釉细胞和乙脑中表达，并作为乙脑内基底膜(IBL)和细胞间基质的组成部分。ODAM KO小鼠显示从牙齿上脱落的JE的完整性被破坏。ODAM通过ODAM rhGEF5 schoHOA信号通路调节细胞骨架。ODAM是否参与了乙脑成釉细胞分化的调节尚不清楚。釉形成后，成釉细胞发生一系列形态学变化。ODAM是否会影响成釉细胞的生物学行为，使其具有乙脑的特征尚不清楚。方法以小鼠成釉细胞系ALC为研究对象,通过慢病毒转导的方法,研究ODAM对ALC细胞在上皮诱导的环境中的变化。应用实时荧光PCR、免疫印迹、免疫细胞化学、免疫染色、荧光素酶报告和Resease分析等方法,对连接上皮CK19、SLPI和ODAM的生物标志物及潜在的调控基因WNT1进行了研究。结果上皮诱导后ODAM,CK19,SLPI显著上调。高表达ODAM可显著增加ALC细胞CK19和SLPI的表达,而下调ODAM可显著降低ALC细胞CK19和SLPI的表达。报道荧光素酶检测表明ODAM激活WNT信号通路，尤其是通过Wnt1。外源性过表达ODAM可上调WNT1的表达，而敲低ODAM可逆转这一作用。WNT1抑制测定进一步证实了上述结果，并显示WNT1通路与交界上皮CK19和SLPI表达的生物标志物呈正相关。Reside研究表明，敲除ODAM中的WNT1后，高表达ALC细胞中CK19和SLPI的表达降低。免疫细胞化学显示ODAM与CK19、SLPI、WNT1共定位于细胞内。结论ODAM通过ODAM 1轴促进ALC连接上皮相关基因的表达,为进一步研究ODAM与JE形成的关系提供了新的思路。

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