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多种无偏性方法鉴定氧化角鲨烯环化酶作为一种有前途的抗利什曼病分子靶点( Multiple unbiased approaches identify oxidosqualene cyclase as the molecular target of a promising anti-leishmanial )
LS Paradela S Wyllie RJ Wall S Carvalho IH Gilbert
表型筛选鉴定出一种苯并噻吩类化合物，具有抗内脏利什曼病病原体多诺瓦尼利什曼原虫的活性。通过多种正交试验，确定了甾醇生物合成的关键酶--氧化角鲨烯环化酶(OSC)作为该外消旋化合物及其对映体的靶点。全基因组测序和全基因组过表达文库的筛选证实OSC基因扩增与化合物1的抗性有关。将OSC基因的异位拷贝导入野生型细胞，降低了对这些化合物的敏感性，证实了这种酶在抗性中的作用。生化分析表明，OSC底物在化合物-1处理的前乳头和无细胞膜制剂中分别积累和耗尽。热蛋白质组图谱证实化合物(S)-1与OSC直接结合。最后，模拟和对接研究确定了化合物-1和LdOSC活性位点之间的关键相互作用。提出了提高这种有前途的抗利什曼原虫药物效力的策略。
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