黄芩苷介导PI3K/AKT通路减轻脂多糖诱导的心肌细胞凋亡及炎症反应

靳宜静 李堪董 詹智晖 王勇 心力衰竭 黄芩苷 脂多糖 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路 凋亡 炎症反应

为探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞凋亡,炎症及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的调控作用,该研究体外培养大鼠心肌H9C2细胞,将其分为对照组(不做干预),LPS组(10μg/mL LPS),实验组(10μg/mL LPS+10,20,40,80μmol/L黄芩苷),黄芩苷+Y组(10μg/mL LPS+10μmol/L黄芩苷+5μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002),抑制剂组(10μg/mLLPS+5μmol/L LY294002)和黄芩苷+A组[10μg/mL LPS+10μmol/L黄芩苷+100 ng/mL PI3K/AKT通路激活剂胰岛素样生长因子-I(IGF-I)].用细胞计数试剂盒-8测定细胞活力;酶联免疫吸附试验检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6和IL-10的含量;Hoechst33258染色法测定细胞凋亡率;5-乙炔基-2 脱氧尿嘧啶核苷测定细胞增殖率;蛋白免疫印迹法测定PI3K/AKT相关蛋白,细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平.结果表明,与对照组相比,LPS组细胞活力显著降低(P<0.05),与LPS组相比,10μg/mL LPS+10μmol/L黄芩苷组细胞活力显著升高(P<0.05),因此选择10μmol/L黄芩苷进行后续实验.与对照组相比,LPS组IL-10含量,细胞增殖率,CyclinD1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),IL-6含量,IL-1β含量,细胞凋亡率,Caspase-3,p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与LPS组相比,黄芩苷组(即10μg/mL LPS+10μmol/L黄芩苷组)和抑制剂组H9C2细胞中上述指标的变化趋势被显著扭转了(P<0.05);与黄芩苷组相比,黄芩苷+Y组IL-10含量,细胞增殖率,CyclinD1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),IL-6和IL-1β含量,细胞凋亡率,Caspase-3,p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05);黄芩苷+A组与黄芩苷+Y组指标变化情况相反(P<0.05).总之,黄芩苷可通过阻断PI3K/AKT通路的信号转导抑制LPS诱导的大鼠心肌H9C2细胞的凋亡及炎症反应.

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