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表面等离子体共振生物传感器结合慢病毒粒子稳定策略快速和特异性筛选p -糖蛋白配体( Surface plasmon resonance biosensor combined with lentiviral particle stabilization strategy for rapid and specific screening of P-Glycoprotein ligands )
Y Cao Y Cao Y Shi Y Cai Y Chai
构建了一种基于表面等离子体共振的P-gp配体筛选系统（SPR-PLSS）并结合慢病毒粒子(LVP)稳定策略，从天然产物中筛选出潜在的P-gp抑制剂。首先，我们构建了P-gp高表达和低表达水平的LVPs。利用包装细胞萌发的LVPs含有细胞膜碎片和它们所携带的P-gp的原理，LVPs可以保证P-gp的天然构象。然后将P-gp高表达的LVPs固定在CM5芯片上，分别作为活性通道和参考通道，将P-gp低表达的LVPs固定在芯片上。因此，亲和力检测是在两个通道上的信号减少的情况下进行的。以P-gp抑制剂Valspodar（Val）和环孢菌素（CsA）为阳性化合物对芯片活性进行了表征，Val和CsA的KD分别为14.09μm和16.41μm。用SPR CM5芯片从天然产物库中筛选出40个化合物，筛选出厚朴酚(Mag)、和厚朴酚(Hon)和白藜芦醇(Res)作为潜在的P-gp配体，显示出显著的响应信号。本工作提出了一种基于LVP固定化生物传感器的P-gp配体筛选系统，用于从天然产物库中快速筛选P-gp配体。与传统的细胞实验需要几天的筛选时间相比，我们的方法只需要几个小时。此外，本研究也为一些复杂的膜蛋白应用于慢病毒的SPR筛选系统提供了坚实的证据
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