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靶向表皮生长因子受体二聚界面的双特异性纳米体:体外和体内肿瘤抑制作用的证据( A bispecific nanobody targeting the dimerization interface of epidermal growth factor receptor: Evidence for tumor suppressive actions in vitro and in vivo )
Z Xu C Qiu B Wen S Wang H Li
靶向表皮生长因子受体(EGFR)结构高度保守且直接参与二聚化的二聚体界面，可以解决困扰抗EGFR治疗的耐药性问题。重链单域抗体作为治疗性抗体具有很好的前景。基于已筛选的靶向EGFR二聚体界面β-环的人源化纳米体、自然杀伤细胞(NK)的抗FCγRIIIa(CD16)纳米体和抗人血清白蛋白(HSA)纳米体，构建了一种双特异性纳米体。目的基因在Pichia pastoris X33中得到有效的表达和分泌，并用阳离子交换和镍螯合层析对表达产物进行纯化。该双特异性纳米体特异性结合于EGFR过度表达的人表皮癌A431细胞表面，在体内外均能有效抑制肿瘤细胞的生长。在A431细胞裸鼠异种移植模型中，双特异性纳米体在外周血单个核细胞（PBMCs）的辅助下生长抑制作用显著增强，与体外实验结果一致，提示存在抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。此外，腹腔给药双特异性纳米体有效地到达肩部背侧区域的肿瘤组织，但分布数量明显少于EGFR二聚体NB77。总之，成功地构建了一种具有ADCC效应的靶向EGFR二聚体界面的双特异性纳米体。
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