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压力毛细管电色谱法同时测定火山石斛中16种重要的生物活性植物激素( Simultaneous determination of 16 important biologically active phytohormones in Dendrobium huoshanese by Pressurized Capillary Electrochromatography )
JW Hao XQ Liu YJ Zang ND Chen MZ Shi
建立了同时测定霍山石斛中16种植物激素的快速加压毛细管电色谱(pCEC)方法。考察了波长、流动相、流速、pH值、缓冲液浓度、外加电压等因素对反应的影响。结果表明:16种植物激素在EP-100-20/45-3-C18反相毛细管柱(全长45cm),有效长度20cm,直径100μm,ODS内填充3μm),以ACN/5.0mM醋酸铵(含0.05%甲酸,pH=3)为流动相,梯度洗脱方式为:0.1-10.0min40%ACN,10-15.0min70%ACN,15.0-20min80%ACN,20-21.0min80%ACN,流速0.12mL/min,外加电压-5kV,紫外检测波长210 nm。方法验证表明,所建立的方法准确、稳定,日内、日间精密度保留时间和峰面积的RSDs均在5%以下。采用所建立的方法,在本实验条件下,在火神草中检测到IAA、IBA、NAA、GA、ABA、t-Z等6种内源激素。而14年生的火神草中检测到的外源激素2,4-D(25.34.2μg/kg)和6-BA(79.535.4μg/kg)相对较多,说明组织培养的火神草虽然从试管苗移栽到大田栽培几年,但仍有一定数量的外源激素残留。
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