通过无偏的全基因组正向遗传筛选检测功能蛋白域

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作者：scidown 发布时间：2021-07-01 15:53:18 文章标题：

通过无偏的全基因组正向遗传筛选检测功能蛋白域( Detection of functional protein domains by unbiased genome-wide forward genetic screening )

文章作者：

M Herzog F Puddu J Coates N Geisler JV Forment SP Jackson

文章简述：

建立遗传和化学-遗传相互作用在阐明某些化学物质干扰细胞功能的机制中发挥了关键作用。与基因破坏/耗竭策略来识别耐药机制相比，寻找能够识别分离或获得功能突变的点突变基因抑制剂受到了限制。在此，通过展示其在鉴定对DNA拓扑异构酶I毒物喜树碱或聚（ADP-核糖）聚合酶抑制剂奥拉帕里布敏感的化学遗传抑制剂方面的效用，我们详细描述了一种在短时间内系统地、大规模地检测酵母或单倍体哺乳动物细胞中自发或化学诱导的抑制剂突变的方法，并在其他单倍体系统中具有潜在的应用前景。除了在分子生物学研究中的应用外，该方法还可用于药物靶点的识别和耐药机制的预测。将抑制子突变定位在蛋白质抑制子命中的一级或三级结构上提供了对功能相关蛋白质结构域的洞察力。重要的是，我们表明olaparib耐药性与PARP1的DNA结合区的错义突变有关，而不是其催化区的错义突变。这为PARP1在DNA上捕获作为PARP抑制剂毒性主要来源的概念提供了实验支持，并指出了一种新的奥拉帕瑞布耐药机制，具有潜在的治疗意义。

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