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自噬水平的提高通过抑制小鼠精母细胞的凋亡来挽救精子发生( Elevation of autophagy rescues spermatogenesis by inhibiting apoptosis of mouse spermatocytes )
Jun Yin Bing Ni Yi-dong Yang Zhong-wei Tang Zhi-qi Gao
自噬和凋亡在一个广泛的串扰中相互联系。我们先前的研究表明，低渗低氧诱导了精母细胞衍生细胞系(GC-2)的显著凋亡。然而，低氧诱导的细胞凋亡是否通过抑制低氧条件下的自噬介导尚不清楚。本研究将GC-2细胞在1%O2中培养，在不同时间点收获。采用吖啶橙染色、cyto-ID染色、mCherry-GFP-LC3B腺病毒转染和Western印迹检测自噬标记物。采用TUNEL染色、流式细胞术、JC-1染色和凋亡相关蛋白Western印迹检测细胞凋亡。我们发现低氧通过线粒体和死亡受体途径诱导GC-2细胞凋亡，并以时间依赖的方式抑制GC-2细胞的自噬通量。GC-2细胞在低氧条件下培养24h前有明显的自溶酶体形成，而在低氧条件下培养24h后才有明显的凋亡。Caspase-8 siRNA处理诱导细胞存活，同时诱导成熟自噬体、酸性囊泡细胞器形成和自噬通量。Beclin-1的过度表达通过抑制小鼠精母细胞凋亡，明显减轻了小鼠精子发生的障碍。本研究结果表明，低氧抑制自噬作用，并通过促进caspase-8的激活，进一步促进低氧诱导的小鼠精母细胞凋亡，提示凋亡抑制和自噬激活联合应用可能是治疗低氧性男性不育的一种治疗策略。
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