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利用逻辑衍生的序列串联质谱对n -聚糖异构体进行结构鉴定( Structural identification of N-glycan isomers using logically derived sequence tandem mass spectrometry )
Chia Yen Liew Chu-Chun Yen Jien-Lian Chen Shang-Ting Tsai Chi-Kung Ni
N-连接糖基化是最重要的蛋白质翻译后修饰之一。尽管N-聚糖的重要性,但N-聚糖异构体的结构确定仍然具有挑战性。在这里,我们发展了一种质谱方法,逻辑衍生序列串联质谱(LODES/MS)来确定N-聚糖异构体的结构,这些结构不能用常规质谱来确定。在LODES/MS中,碰撞诱导的连续解离序列来源于碳水化合物的解离机制,并应用于离子阱中的N-聚糖结构测定。我们用合成的N-聚糖对LODES/MS进行了验证,并将该方法应用于从大豆、卵白蛋白和IgY中提取的N-聚糖。我们的方法不需要过甲基化、还原和标记N-聚糖,也不需要低聚糖和N-聚糖标准品的质谱数据库。此外,它可以应用于所有类型的N-聚糖(高甘露糖、杂化和复合物),以及通过任何酶或酸水解从较大的N-聚糖降解的N-聚糖。
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