抗艾美肽多克隆抗体的制备与鉴定

Scidown文献预览系统！

作者：scidown 发布时间：2021-06-21 15:14:48 文章标题：

抗艾美肽多克隆抗体的制备与鉴定( Preparation and characterization of anti-Amelotin polyclonal antibody )

文章作者：

S Yan JJ Zhang TT Han DL Li YG Gao Amelotin prokaryotic expression polyclonal antibody

文章简述：

目的：构建小鼠Amelotin重组质粒，表达小鼠Amelotin蛋白并制备其多克隆抗体。方法：从GenBank下载小鼠Amelotin基因cDNA序列。RT-PCR扩增出不含信号肽的编码区。然后将其重组到原核表达载体pET32a中，转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组蛋白经IPTG诱导后,经亲和纯化得到重组蛋白,免疫新西兰兔获得多克隆抗体,ELISA鉴定抗体效价,Western blot和免疫组化鉴定抗体。结果：构建了重组原核表达载体pET32a-Amelotin,并成功纯化了重组原核表达载体pET32a-Amelotin。酶联免疫吸附试验结果表明，所产生的抗血清效价为1:12 800。Western blot和免疫组化分析表明该抗体与Amelotin特异性结合。结论：以纯化的重组Amelotin为免疫原制备了高效价和特异性的兔抗Amelotin抗体，为进一步研究Amelotin的检测和功能奠定了基础。

文章下载地址（开放版）：