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分化Caco2/HT-29共培养作为人肠上皮体外模型的形态功能特性( Morphofunctional properties of a differentiated Caco2/HT-29 co-culture as an in vitro model of human intestinal epithelium )
A Ferraretto M Bottani PD Luca L Cornaghi E Donetti Caco2 Co-culture Differentiation HT-29 Transmission electron microscopy
以人小肠上皮为模型,建立了70/30CaCO2/HT-29肠上皮细胞共培养体系。在汇合0时(T0)和电镀后汇合后3、6、10和14天(分别为T3、T6、T10和T14)采集共培养物进行形态学和功能分析。透射电镜显示T0~T14不同的特征:T6为微绒毛和完整的连接器,T3为粘液颗粒,PAS/Alcian蓝染色也证实了这一点。碱性磷酸酶(ALP)、氨基肽酶N(APN)和二肽基肽酶IV(DPPIV)的比活性在T0后逐渐升高,表明获得了分化的消化表型。代表单层屏障特性的跨皮电阻(TEER)从T0增加到T6,达到与人小肠非常相似的值。路西法黄(LY)的表观渗透系数,以及形态分析,揭示了紧密连接的良好状态。在T14时,HT-29细胞下降到18.4%,并形成圆顶,表明营养物质的跨上皮转运。这种CaCO2/HT-29共培养物可以被认为是一种多用途的、适合于存在一种以上流行肠细胞类型的人肠上皮的玻璃体模型,其方法是在不需要特定的亚克隆诱导剂和生长支持的情况下获得至少6至最多14天的汇合后天以达到肠分化表型。
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