基于金纳米颗粒的布鲁氏菌横向流动检测(LFA)试纸条试验的开发与评价( Development and evaluation of a gold nanoparticle based Lateral Flow assay (LFA) strip test for detection of Brucella spp )

C Prakash B Kumar RP Singh P Singh VK Gupta

目前广泛应用的布病血清诊断试验(RBPT、CFT、I-ELISA和FPA）不能检测出血清阴性的垂直感染或带菌动物，这是群内其他易感动物的持续传染源。为了减少疾病在畜群内的传播，这些动物必须使用快速、敏感、用户友好的penside诊断测试来检测。本研究建立了布鲁氏菌横向流式免疫试条法检测布鲁氏菌的方法。来自临床样本（牛流产胎儿胃内容物）。将抗布鲁氏菌多克隆抗体（PAb）和抗牛抗体IgG分别印刷在检测线和对照线上制成LFA条。对于接合，将胶体金纳米颗粒（30 nm GNP，Sigma USA）与抗布鲁氏菌pAb接合。LFA条带试验在PBS中可检出10 7cfu/mL流产B.bortus S99灭活菌,与选定的非布鲁氏菌病原体无交叉反应。为进一步验证，对115例临床标本进行了LFA纸条试验。以PCR和培养法为参考标准，用ROC曲线分析法测定LFA条试验的相对敏感性（DSn）和相对特异性（DSp）。LFA条试验的DSn和DSp为78.57%(95%CI:49.2-95.3)；93.07%(95%CI:86.2-97.2)和80.0%(95%CI:51.9-95.7)；以培养和PCR作为参考诊断试验的阳性率分别为94.0%(95%CI:0.795-0.925)。结论：LFA条试验可作为布鲁氏菌病快速诊断试验。据我们所知，这是首次开发基于GNP的LFA条带检测布鲁氏菌的报道。从牛流产的胎儿含量样本中提取。

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