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氨基功能化沸石/ sio2复合胰蛋白酶-凝乳蛋白酶共固定化材料的制备及表征( Preparation and Characterization of Amino-Functionalized Zeolite/SiO 2 Materials for Trypsin–Chymotrypsin Co-immobilization )
D Doan S Sezer A Ulu S Kytepe B Ate
无机载体不仅可以提高酶的稳定性,而且可以降低酶促反应的最终成本,因此在酶固定化方面受到越来越多的关注。本文探讨了氨基功能化沸石/SiO2材料对胰蛋白酶-胰凝乳蛋白酶混合物共固定化的适用性。为此,将胰蛋白酶-胰凝乳蛋白酶混合物共固定在氨基功能化沸石/SiO2材料上,固定化收率为80.7±7.6%。采用多种技术对预支撑及其改性进行了表征。此外,在pH5.0的条件下,用zeta电位研究了材料的电荷。如预期的那样,氨基化后的zeta电位从24.4 mV移动到8.16mV。固定化后,最适pH(9.0)不变,最适温度由50°C移至40°C。固定化胰蛋白酶-糜蛋白酶比可溶性胰蛋白酶-糜蛋白酶具有更高的热稳定性和贮存稳定性。计算了固定化酶的动力学参数,但V max无明显变化,K m值增大,表明固定化后酶对底物的亲和力降低。最惊人的是,固定化胰蛋白酶-糜蛋白酶经8次重复循环后的剩余活性为58%。初步实验结果表明,氨基功能化沸石/SiO2颗粒可以作为固定化胰蛋白酶-糜蛋白酶的载体。
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