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基因组学方法改进菌株选择的分析和设计( A genomics approach to improve the analysis and design of strain selections )
TE Warnecke MD Lynch A Karimpour-Fard N Sandoval RT Gill 3-Hydroxypropionic acid Tolerance Selection Strain engineering Multi-SCale Analysis of Library Enrichments (SCALEs
菌种工程传统上是以利用诱变、选择和筛选来开发改良菌种为中心的。虽然突变和筛选方法已有很好的特点,但对选择的了解仍然很少。我们假设我们可以使用一种全基因组的方法来评估实验室选择,以设计对单一所需表型具有增强敏感性(真阳性)和特异性(真阴性)的选择。为了验证这一假说,我们首先应用文库富集的多尺度分析(SCALEs)来鉴定随着3-羟基丙酸(3-HP)水平的增加,连续流选择中适合度增加的基因。我们发现这种选择不仅丰富了3-HP耐受表型,而且丰富了壁粘附表型(41%的假阳性)。利用这个全基因组数据,我们设计了一个3-HP梯度递减的串批选择。通过ROC分析进一步检查证实,系列批次方法导致我们所需表型(3-HP耐受)的敏感性(46%)和特异性(10%)显著增加。
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