离子迁移质谱法从多糖释放后的孵育混合物中直接提取n -葡聚糖的光谱:应用于完整折叠HIV gp120的工程糖型葡聚糖

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作者：scidown 发布时间：2021-06-17 17:06:27 文章标题：

离子迁移质谱法从多糖释放后的孵育混合物中直接提取n -葡聚糖的光谱:应用于完整折叠HIV gp120的工程糖型葡聚糖( Ion Mobility Mass Spectrometry for Extracting Spectra of N-Glycans Directly from Incubation Mixtures Following Glycan Release: Application to Glycans from Engineered Glycoforms of Intact, Folded HIV gp120 )

文章作者：

DJ Harvey F Sobott M Crispin A Wrobel C Bonomelli S Vasiljevic CN Scanlan CA Scarff K Thalassinos JH Scrivens Ion mobility N-glycans gp120 glycoprotein glycan release negative ion fragmentation

文章简述：

天然生物来源的糖基化分析常常因可用物质丰度低而受挫。本文利用离子迁移率结合电喷雾质谱技术，从重组表达的人免疫缺陷病毒(HIV)包膜糖蛋白gp120的系列滴定中，提取了由PNGase F释放的N-聚糖的光谱。还分析了在？-甘露糖苷酶抑制剂中表达的gp120，以及在缺乏GlcNAc转移酶I的匹配哺乳动物细胞系中表达的gp120。没有离子迁移率分离，ESI光谱通常不包含来自聚糖的可观察到的离子，而来自其它化合物如洗涤剂和残留缓冲盐的离子大量存在。在Waters T波离子迁移率质谱仪上进行离子迁移率分离后,N-聚糖落入离子迁移率/m/z图的一个独特区域,从而使它们的分布以良好的信噪比被提取出来。这种方法允许从粗培养混合物中提取N-聚糖，即使在表面活性剂如NP40存在时也不需要清洗。此外，这种技术允许从亚微克量的糖蛋白中获得清晰的剖面。聚糖谱与MALDI-TOF MS谱相似，但更易发生双电荷和断裂。结构分析可以通过正负离子模式的MS/MS实验来完成，但负离子模式给出的光谱信息量最大，为从少量糖蛋白中分析聚糖提供了一种可靠的方法。美国质谱学会，2011年

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