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g四倍体形成适配体增强肌红蛋白对鲁米诺的过氧化物酶活性( G-quadruplex-forming aptamer enhances the peroxidase activity of myoglobin against luminol )
Tsukakoshi Kaori Yamagishi Yasuko Kanazashi Mana Nakama Kenta Oshikawa Daiki Savory Nasa Matsugami Akimasa Hayashi Fumiaki Lee Jinhee Saito Taiki Sode Koji Khunathai Kanjana Kuno Hitoshi Ikebukuro Kazunori
适体可以控制酶的生物学功能，从而促进新型生物传感器的开发。虽然在生物传感器中发现了抑制酶催化反应的适体，并将其作为信号转导器来检测目标分子，但还没有发现能放大酶活性的适体。在本研究中，我们报道了G-四链体(G4)形成的DNA适配体，该适配体上调肌红蛋白中针对鲁米诺的过氧化物酶活性。通过体外筛选，发现了一个通过肌红蛋白过氧化物酶活性增强鲁米诺化学发光的G4型适体。通过我们的策略--In silico maturation,这是一种遗传算法辅助的序列操作方法,通过在适体序列中引入突变来提高适体的增强活性。在最适pH为5.0的条件下，最佳适体保持了平行G4性质，鲁米诺对过氧化物酶活性的化学发光比单纯肌红蛋白高300倍以上。此外，利用血红素和血红素结合适体，我们证明G4适体与肌红蛋白中血红素的结合特性可能是发挥增强作用所必需的。对其中一个适体进行了结构鉴定，发现了一个具有螺旋桨状环的平行型G4结构，这可能为利用G4适体-肌红蛋白对设计适体敏感子提供了依据。
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