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简单、灵敏的BIO-PCR检测马铃薯茎、块茎和土壤中黑腿病病原菌( Simple and sensitive BIO-PCR detection of potato blackleg pathogens from stem, tuber, and soil samples )
Y Aono T Nakayama T Ozawa Y Ushio S Yasuoka T Fujimoto T Ohki N Oka T Maoka
建立了马铃薯黑腿病病原菌的生物PCR检测方法,包括山葵果壳杆菌(Pectobacterium wasabiae,Pw)、山葵果壳杆菌(P.atropepticum(Pa),胡萝卜假单胞菌(P.carotovorum subsp.brasiliense(Pcb)和dianthicola(Ddi)。该方法基于果胶基液体富集培养基(LEM)对病原菌的半选择性培养和黑腿病原菌的PCR检测(三重PCR检测Pw、Pa和Ddi,单重PCR检测Pcb,采用以前报道的引物)。在LEM中25°C培养24-120h可有效地检测植物(茎、块茎)和根周围土壤中的病原菌。BIO-PCR对4种病原菌的检出限为2-8个菌落形成单位(cfu),而对Pw、Pa、Pcb、Ddi的检出限分别为2×10 2、3×10 3、6×10 1和2×10 1个菌落形成单位(cfu)。Bio-PCR还能从病株的症状茎、子代块茎和茎基部周围土壤中检测到4种黑腿病菌。该方法不仅可用于种子检验,而且可用于流行病学研究,为马铃薯黑腿病的有效检测提供了一种很有前景的技术。
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