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活细胞成像揭示了核糖体停止引发的质量控制的动力学决定因素( Live-cell imaging reveals kinetic determinants of quality control triggered by ribosome stalling )
DH Goldman NM Livingston J Movsik B Wu R Green
有问题的mRNA序列的翻译导致核糖体停滞,引发质量控制事件,包括核糖体拯救和新生多肽降解。为了确定这些过程的定时和调控,我们开发了一个基于Suntag的报告器来实时监测单个mRNAs上有问题序列(Poly[a])的翻译。尽管含有poly(A)的mRNAs在几分钟到几小时的时间尺度上进行连续翻译,但核糖体负载比对照增加了3倍,这反映出核糖体的长长的队列延伸到停顿的上游。我们实时监控这些队列的分辨率,发现核糖体救援与伸长和终止相比都非常缓慢。停顿强度、碰撞频率和碰撞传感器ZNF598的调制揭示了核糖体碰撞的动力学及其识别如何促进质量控制的选择性靶向。我们的研究结果表明,缓慢清除停顿的核糖体使细胞能够区分暂时性停顿和有害停顿。
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