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使用分区荧光指示剂测量激动剂敏感内部存储的游离[Ca2+]变化。( Measurement of free [Ca2+] changes in agonist-sensitive internal stores using compartmentalized fluorescent indicators. )
AM Hofer
荧光Ca2+指示剂的乙酰甲基(AM)酯衍生物不仅在细胞质中而且在细胞器中积累,这一事实很久以前就被认为是细胞质[Ca2+](1,2)测量过程中潜在的伪影来源。后来,观察到高亲和力染料,如fluo-3和fura-2,通常在激动剂敏感的Ca2+储存的高[Ca2+]环境中饱和,在特殊条件下(例如,当池已部分空时),可记录该室中[Ca2+]的变化(3-6)。然而,当研究者开始使用较低亲和力的探针如magfura-2(7)来监测肌醇(1,4,5)三磷酸[INS(1,4,5)P3]敏感库(一个基本上被认为是内质网[ER])中[Ca2+]的变化时,指示剂变得室化的倾向得到了充分的利用。因此,如ER捕获染料所报道的,这种细胞器被Ca2+释放和重新装载的过程可以在单个透性细胞中以高的时空分辨率直接显示(8,9)。这一基本方法已被许多实验室采用,用于研究Ca2+振荡(10-12)到量子释放(13-15)以及Ca2+储存位点的亚细胞定位(16-19)等现象。
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