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微染色体复制是质体基因组工程的新工具( Replicating minichromosomes as a new tool for plastid genome engineering )
Anna Jakubiec Alena Sarokina Sandrine Choinard Florina Vlad Alexander P. Sorokin
植物分子农业,即以植物为宿主生产治疗性蛋白质和高价值化合物,近年来引起了人们的极大兴趣。尤其是叶绿体,是外源基因表达的一个极具吸引力的亚细胞室。在这里,我们提出了一种新的方法,转基因导入和表达叶绿体,不同于经典的方法,不需要转基因插入叶绿体基因组。相反,转基因被扩增成一个物理上独立的实体,称为“微染色体”。扩增发生在辅助蛋白的存在下,辅助蛋白通过识别转基因侧翼的特定序列启动复制过程,导致极高水平的转基因DNA积累。重要的是,我们证明了这些扩增的转基因作为外源蛋白表达的模板,在植物发育过程中保持稳定,并通过母系传递给后代。这些发现表明,基于微染色体体的方法是叶绿体转基因表达和细胞器基因组工程的一个有吸引力的工具。
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